Прямые методы:
- обнаружение боррелий с помощью темнопольной микроскопии (применяется для определения спонтанной инфицированности клещей боррелиями (исследуется гемолимфа и содержимое кишечника клеща));
- культивирование боррелий на питательных средах;
- полимеразная цепная реакция для обнаружения специфической ДНК (чувствительность не превышает 20%).
Косвенные методы – направлены на определение антител в организме больного:
- ИФА
- РНИФ (диагностический титр – 1:64)
- вестерн-иммуноблоттинг (Western-blot)
Результативность диагностических тестов зависит от модификации, используемого антигена (геновида), от формы и стадии болезни, от предшествующего лечения антибиотиками.
Следует внимательно подходить к интерпретации полученных результатов (табл. 1, 2).
Причины ложноположительных результатов
| Перекрестные
антигены |
Инфекционные причины:
— сифилис — лептоспироз — возвратный тиф — лихорадка Скалистых Гор — инфекции, вызванные ЦМВ, ВЭБ, VZV — туберкулез — представители нормальной микрофлоры полости рта |
| Неинфекционные причины:
— аутоиммунные заболевания: ревматоидный артрит, диффузные заболевания соединительной ткани — рассеянный склероз — неопрастические процессы — саркоидоз |
Неопределенные (сомнительные) результаты возможны при взаимодействии белков боррелий с белками Y.enterocolitica O3, E.coli, C.jejuni, N.meningitidis, H.influenze, пневмококков, стафилококков, M.tuberculosis.
Причины ложноотрицательных результатов:
- иммунодепрессивные состояния (неопрастические процессы, СПИД);
- ранние стадии КБ (на первой стадии антитела методом РНИФ выявляются только у 20%) или поздняя стадия (в 3-й стадии, как и при сифилисе, антитела (АТ) могут не обнаруживаться);
- использование диагностических тест-систем с ограниченным набором антигенов (только, OspA), а у боррелий, персистирующих в организме человека, эти белки отсутствуют
Характеристика гуморального иммунного ответа при КБ
| Стадия | Иммунный ответ |
| I – ранняя/локализованная инфекция | Начальный ответ IgM (с третьей недели с момента инфицирования) с последующим появлением IgG антител (с 6-й недели с момента инфирования). Часто выявляется серонегативность. IgM антитела часто не определяются при короткой длительности инфекции |
| II – ранняя диссеминированная инфекция | Иммунный ответ аналогичен таковому на стадии I, с преобладанием IgG антител. Продукция интратекальных антител при нейроборрелиозе. |
| III – поздняя/персистирующая инфекция | Как правило высокие титры IgG антител при артрите и акродерматите. IgM антитела обычно не выявляются. Продукция интратекальных антител при хроническом нейроборрелиозе. |
Если у пациента при неоднократных исследованиях постоянно обнаруживаются IgM (без сероконверсии), то это следует расценивать как ложноположительный результат. Причина этого явления часто остается невыясненной.
